96T 10min Hohe Empfindlichkeit β-Laktame und Tetracycline (BT) Schnellteststreifen zur Erkennung von Antibiotika-Rückständen in Milch

Der BT Kombi-Streifentest ist ein qualitativer und schneller Lateral-Flow-Assay, der zur Detektion von Rückständen von Beta-Laktam- und Tetracyclin-Antibiotika in roher, vermischter Kuhmilch entwickelt wurde. Dieser Test verwendet einen Tetracyclin-Rezeptor und ein neuartiges Beta-Laktam-bindendes Protein, wodurch kein Heizblock erforderlich ist. Dieser Test ist für den Point-of-Care-Einsatz oder in Referenzlaboren konzipiert.

Die C-Linie zeigt die Anwesenheit des entsprechenden Antibiotikums in der Milch an. Je stärker die Signalintensität an der Testlinie reduziert ist, desto höher ist die Konzentration an Tetracyclin- oder Beta-Laktam-Antibiotika in der Milch. Der Assay ist auch so konzipiert, dass Tetracyclin- und Beta-Laktam-Antibiotika gleichzeitig nachgewiesen werden können.

Der BT Kombi-Streifentest hat eine Kapazität für 96 Bestimmungen. Die Haltbarkeit beträgt 12 Monate bei ordnungsgemäßer Lagerung des Kits. Die Positiv- und Negativkontrollfläschchen enthalten lyophilisiertes Rohmilchproben und müssen vor Gebrauch mit 1 ml destilliertem Wasser rekonstituiert werden. Das Positivkontrollfläschchen ist mit 4 ppb Penicillin G und 100 ppb Oxytetracyclin versetzt. Die rekonstituierten Rohmilchkontrollen sind 48 Stunden bei 4°C stabil. Zusätzliche Positiv- und Negativkontrollfläschchen sind separat erhältlich.

Der Assay verwendet ein kompetitives, kolloidales Gold-basiertes Format. Die Milchprobe (200 μL) wird in ein klares Kunststoff-Reaktionsgefäß gegeben und zum Resuspendieren der lyophilisierten Reagenzien zu einer gleichmäßigen rosa Farbe am Boden der Mikrotiterplattennäpfchen verwendet. Die Milch wird kurz inkubiert (3 min), damit die beiden antibiotikabindenden Proteine auf den Goldpartikeln mit vorhandenen Antibiotika in der Milch reagieren können.

Der Teststreifen wird dann mit den Pfeilen nach unten in das Probennäpfchen eingeführt, was den Kapillarfluss entlang des Streifens initiiert. Nicht mit Antibiotika in der Milch komplexiert gebliebene Goldpartikel binden an ihre jeweilige Testlinie und bilden ein Signal (rote Linie) an dieser Position. Jeder Teststreifen ist mit zwei Testlinien und einer Kontrolllinie (C-Linie) bedruckt. Eine Testlinie ermöglicht den Nachweis von Tetracyclinen, die andere den Nachweis von Beta-Laktam-Antibiotika.

Wenn das Bindungsprotein auf dem Goldpartikel mit einem in der Milchprobe vorhandenen Tetracyclin- oder Beta-Laktam-Antibiotikum reagiert hat, fließt das Goldpartikel an der Testlinie, die diesem Antibiotikum entspricht, vorbei und erreicht die C-Linie. Zur visuellen Interpretation der Testergebnisse zeigt jede Testlinien-Signalintensität, die stärker ist als das Signal an der C-Linie, ein negatives Ergebnis an. Ein Signal an einer Testlinie, das gleich oder weniger intensiv ist als das an der C-Linie, zeigt ein positives Ergebnis an.